產(chǎn)品及特點:
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有馬鈴薯的成分?,F(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增馬鈴薯源性成分,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5.本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:
編號
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成分
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規(guī)格
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試劑一
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PCR MagicMix 3.0
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1 mL(紅蓋)
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試劑二
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超純水
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1 mL(亮黃色)
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試劑三
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馬鈴薯源性成分PCR引物混合液
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100 μL(白蓋)
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試劑四
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馬鈴薯源性成分PCR陽性對照(1×10E8/μL)
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50 μL(黃蓋)
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試劑五
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使用手冊
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1 份
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運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 DNA。
馬鈴薯源性成分PCR試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加10μL馬鈴薯源性成分PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:
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成份
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N+2 個樣品管
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PCR 陰性對照
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PCR陽性對照
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PCR Magic Mix 3.0
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各 20μL
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20μL
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20μL
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馬鈴薯源性成分PCR引物混合液
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各 2μL
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2μL
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2μL
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N+2個樣品DNA模板
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各18μL
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PCR 陰性對照(水)
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--
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18μL
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--
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PCR 陽性對照(馬鈴薯源性成分PCR陽性對照1000倍稀釋液)
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--
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--
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18μL
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4.按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):
過程
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溫度
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時間
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預(yù)變性
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95℃
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5 min
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PCR 反應(yīng)(35 個循環(huán))
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95℃
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30 sec
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55℃
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30 sec
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72℃
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40 sec
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延伸
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72℃
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7 min
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三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。