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ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)問答分享
日期：2024-09-20 07:30
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摘要：1. ELISA實(shí)驗(yàn)中，檢測(cè)計(jì)算抗原的濃度，臨界值怎么確定？
答：根據(jù)曲線測(cè)定的濃度，建議落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間位置較好，限不要超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的上下限，如果超出較多，會(huì)影響計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確性，建議調(diào)整稀釋比例。
2.加完終止液之后測(cè)的幾次數(shù)據(jù)差別也蠻大，是什么原因？
答：加完終止液后，顯色反應(yīng)也不是永遠(yuǎn)停止，形成的黃色顏色會(huì)隨著時(shí)間延長(zhǎng)繼續(xù)加深，建議在15 min內(nèi)讀數(shù)。
3.樣本總是在標(biāo)準(zhǔn)曲線之外，稀釋100倍也是，怎么辦？
答：在設(shè)置稀釋倍數(shù)之，需要參考相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)于一些表達(dá)高的蛋白，確實(shí)會(huì)出現(xiàn)這種情況，之小編接到過的案例，樣品需要稀釋10000倍，目的蛋白才落在檢測(cè)區(qū)間內(nèi)。建議繼續(xù)提高稀釋比例。
1. ELISA實(shí)驗(yàn)中，檢測(cè)計(jì)算抗原的濃度，臨界值怎么確定？
答：根據(jù)曲線測(cè)定的濃度，建議落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間位置較好，限不要超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的上下限，如果超出較多，會(huì)影響計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確性，建議調(diào)整稀釋比例。
2.加完終止液之后測(cè)的幾次數(shù)據(jù)差別也蠻大，是什么原因？
答：加完終止液后，顯色反應(yīng)也不是永遠(yuǎn)停止，形成的黃色顏色會(huì)隨著時(shí)間延長(zhǎng)繼續(xù)加深，建議在15 min內(nèi)讀數(shù)。
3.樣本總是在標(biāo)準(zhǔn)曲線之外，稀釋100倍也是，怎么辦？
答：在設(shè)置稀釋倍數(shù)之，需要參考相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)于一些表達(dá)高的蛋白，確實(shí)會(huì)出現(xiàn)這種情況，之小編接到過的案例，樣品需要稀釋10000倍，目的蛋白才落在檢測(cè)區(qū)間內(nèi)。建議繼續(xù)提高稀釋比例。
4.試劑盒里面有捕獲抗體么？
答：即用型ELISA試劑盒中，捕獲抗體已經(jīng)預(yù)包被至試劑盒中的ELISA板上，沒有單獨(dú)的捕獲抗體提供，直接使用ELISA板孵育稀釋后的樣本及標(biāo)準(zhǔn)品即可。非即用型的ELISA試劑盒會(huì)有捕獲抗體提供，需按照說明書推薦的工作濃度，用稀釋液稀釋后自行包被。
通蔚生物主營(yíng)范圍：科研細(xì)胞，ELISA試劑盒，生物試劑，細(xì)胞培養(yǎng)，血清，免疫組化抗體，一抗，二抗，單克隆和多克隆抗體等一系列供學(xué)校、醫(yī)學(xué)院、研究所等單位科研實(shí)驗(yàn)用的科研產(chǎn)品，本公司專業(yè)代理國(guó)內(nèi)外品牌生命科學(xué)試劑產(chǎn)品，產(chǎn)品范圍涉及細(xì)胞生物學(xué)，分子生物學(xué)，免疫學(xué)及生物化學(xué)等實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究試劑。